抗体药在目前药物领域中占据了主导地位，研发的流程一般包括7个阶段：靶点确认、抗体发现、功能验证、工艺开发、临床阶段、申报审批、上市。
其中，抗体发现的途径主要分为3类：杂交瘤技术、抗体库、单B细胞克隆技术。杂交瘤技术作为抗体发现主要途径之一，一直在不断地优化发展，加速抗体发现的过程，推动新药研发。
杂交瘤技术也叫做单克隆抗体技术，是基于特定的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，分离出针对给定抗原的单抗的常用技术。
B淋巴细胞能够产生并分泌抗体，每个B细胞克隆仅生成一种特定的抗体，即所谓的单克隆抗体。骨髓瘤细胞，一种来源于B细胞的可以无限传代的肿瘤细胞。杂交瘤技术就是将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合，从而形成可在体外长期存活并分泌抗体的杂交瘤细胞，通过对这些杂交瘤细胞的克隆化处理，可以获得单一杂交瘤细胞的单克隆细胞系，这种技术就可以让我们在体外对单克隆抗体进行高效的筛选和制备。
图1 杂交瘤技术流程示意（以鼠杂交瘤为例）
目前，市面上针对产生与抗原特异性结合抗体的杂交瘤筛选主要采用的是ELISA的方法。但传统的ELISA方法操作步骤较为繁琐，耗时较长，很难提升通量进而加快筛选进程。
诺唯赞自主研发的Add&Read®（免洗ELISA）技术，基于TR-FRET原理（时间分辨-荧光共振能量转移）的快速均相检测方法学，与ELISA相比，省去了包被、洗板、显色等步骤，只需要加样-检测2步，即可完成，可节省大量的人力及操作时间。
图2 Add&Read®(免洗ELISA)技术操作流程示意
筛选针对特定靶点（如带His标签的抗原）的鼠抗抗体，通过TR-FRET技术组合一个6His-antigen和小鼠杂交瘤上清中的抗体发生相互作用的结合检测assay，下图为Add&Read® Anti-6His-Eu与Add&Read® Anti-mouse IgG Fc-A2搭配组合展示。
图3 基于特定抗原结合作用的小鼠杂交瘤筛选原理展示
筛选与阳性抗体共同识别抗原同一表位的鼠抗抗体，通过在阳性抗体上标记荧光小分子，利用TR-FRET技术组合一个可以筛选与阳性抗体共同识别抗原同一表位的鼠抗的竞争assay，诺唯赞可提供如下图所示的同表位鼠抗竞争法体系搭建方案和与体系对应的标签抗体。
图4 基于同表位鼠抗竞争法的三元体系筛选原理展示
筛选与阳性抗体共同识别抗原同一表位的鼠抗抗体，通过TR-FRET技术组合一个可以筛选与阳性抗体（以人抗为例）共同识别抗原同一表位的鼠抗的竞争assay，诺唯赞可提供如下图所示的同表位鼠抗竞争法体系搭建方案和与体系对应的标签抗体。
注意：该体系搭建方法需注意阳性抗体与待测抗体需为不同种属。
图5 基于同表位鼠抗竞争法的四元体系筛选原理展示
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诺唯赞能够在4-8周内为您提供优质的定制化方法开发服务，服务项目包含：检测体系的建立、优化、验证以及抗原/抗体荧光标记。通过可行性评估之后，我们可以根据您的需求建立检测体系，并确保体系的技术转移。
