品牌时光机-品牌案例《神奇抗体大揭秘，从传统到重组，你该选哪个？》

Recombinant Antibody

速通总结

文末有惊喜~

▶︎ 什么是重组抗体？

重组抗体是将经过挑选的单抗基因序列克隆到表达载体后，瞬时转染宿主细胞，在非动物的体系中生产的抗体。克服了传统抗体批次间一致性低、遗传漂变、复杂生物体系中的抗体特异性等问题。

▶︎ Abcam重组抗体有哪些独特优势？

• Biophysical QC验证：通过检查其“分子指纹”确认重组抗体身份，确保批间一致性

• 敲除验证：3,800+重组抗体通过敲除验证，确保特异性

• 广泛的应用验证：10项抗体应用验证，行业平均通常验证4项

▶︎ 如何挑选我想要的重组抗体？

👉点击此处查看Abcam 32000+重组抗体，或是通过产品上方标签来辨别是否为重组抗体

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《抗体基础指南》

一位实验人可能会碰到以下情况：

照着文献重复认真实验却无法复现他人的结果？

多年前的实验结果却也可能无法重现

但你可能并不知道世界上有

为何如此？

克服上述可重复性危机是Abcam研发工作的核心，因此我们我们不断坚持产品创新，推出超全面的重组抗体产品组合，并围绕着严格、广泛的抗体验证开展了大量的工作，引领着抗体质量行业新的标准。

重组抗体是将经过挑选的单抗基因序列克隆到表达载体后，瞬时转染宿主细胞，在非动物的体系中生产的抗体，见下图。

由于重组抗体是在体外克隆抗体基因、瞬时转染宿主细胞表达生产，只要转染的DNA质粒序列不发生突变，以及宿主细胞状态是良好的，那么每个批次的重组抗体性能将是可控的，从而克服了传统抗体批次间一致性低、遗传漂变、复杂生物体系中的抗体特异性等问题，重组抗体与传统抗体的比较见下表。

	多抗	单抗	重组抗体
生产方法	抗原免疫动物后，多个 B 细胞作出免疫应答，产生异质性抗体混合物。	将免疫动物中可产生抗体的 B 细胞与骨髓瘤细胞融合，生成可产生抗体的杂交瘤细胞系。	将选定抗体的基因序列克隆到一个表达载体上，随后转入表达宿主细胞，进行无动物生产。
特异性	与具有相似序列的其它蛋白产生交叉反应的风险较高。	识别单一表位，一般特异性比多抗好，但取决于抗体验证方法。	经严格抗体验证后，特异性长期有保障。
灵敏度	变量，取决于抗体验证	变量，取决于表位可及性和抗体验证	经严格抗体验证后，灵敏度长期有保障。
批次间一致性	包含有多个抗原表位的多种抗体。动物经多次免疫收集血清后，不能继续使用该动物生产抗体，批次间差异大。	杂交瘤细胞系可能会发生漂移和突变，进而可能导致抗体批次间差异大，影响实验可重复性。	采用已知的基因序列体外克隆瞬时表达，可随时进行稳定生产，一致性好。

重组PD-L1抗体[28-8] (👉ab205921)多个不同批次在IHC、ICC/IF、Flow Cyt应用测试结果

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IHC

ICC/IF

Flow Cyt

Abcam经过多年长期的积累，目前已经开发了32,000+的精准重组抗体，将为您的研究/项目带来以下好处：

实验结果可信，一次有效，次次可靠

• Biophysical QC在分子水平上确认每一批次重组抗体的“指纹“信息

• 特异性出色，3,800 多种抗体经过基因敲除验证

• 广泛大量的应用验证

• 灵敏度更高

实验结果可重复，长期项目数据具有延续性

• 批间差异小

• 保证长期供应，可批量生产

Abcam 重组抗体独特优势

Biophysical QC验证

Biophysical QC，即生物物理质量控制，其可检测评估重组抗体的序列一致性、完整性、抗体聚集及纯度，记录每个抗体不易获知的独特特征，或通俗地说，记录每个抗体的“指纹”信息，其已在制药领域治疗性抗体开发中应用较多。Abcam Biophysical QC方法采用液相色谱-质谱联用（LC-MS）和分子排阻高效液相色谱（HPLC-SEC）等技术。

目前Abcam已对其85%的重组抗体进行了Biophysical QC验证来确保抗体的一致性、特异性和灵敏度，没有其它试剂供应商对抗体进行这种水平的分析验证。

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Abcam 重组抗体独特优势

敲除验证

敲除验证是接受度最广且最受信任的抗体特异性验证方法之一，其在不表达目的蛋白的 KO 细胞系或组织中通过检测目的抗体来确证其特异性。

Abcam 主要采用广泛的人单倍体HAP1 KO细胞系库来进行敲除验证，这些 KO 细胞系通过 CRISPR-Cas9 生成，并通过 Sanger 测序鉴定。如下图所示，在 KO 细胞系中测试特异性抗体时，特异性抗体不会产生信号，但在野生型细胞系测试特异性抗体时，特异性抗体会产生特异性靶标信号，进而我们称该特异性抗体为经敲除验证的抗体。

重组Anti-Vimentin抗体[EPR3776](👉ab92547) 通过WB，ICC/IF, Flow Cyt应用进行敲除验证

目前，我们3800+重组抗体通过了敲除验证，Abcam也因敲除验证方面的工作分别荣获2020年和2022年CiteAb奖项。

“我们在使用相同抗体进行重复实验时，持续观察到一致的结果，这使我们有信心认为所见的现象具有生物学真实性。”

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Abcam 重组抗体独特优势

广泛的应用验证

抗体验证必须针对特定实验应用开展验证才能确保有效。一般而言，科研用途的抗体会在4项实验应用中进行验证，而我们会对重组抗体进行多达10项实验应用的验证，以确保您使用该重组抗体获得可靠、可信的实验结果。

这些实验应用包括在组织芯片上做免疫组化，在3个不同物种、多达50种不同类型组织中验证重组抗体的特异性和灵敏度等性能。

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全面的重组抗体产品组合

满足您的实验需求

Abcam经严格验证的32,000+重组抗体，适合不同实验应用，包含13,000+无载体形式重组抗体、8,000+直标重组抗体，420+重组多克隆，190+重组嵌合抗体。

32,000+ 重组抗体，包含：
13k+无载体抗体	8k+偶联抗体	420+多克隆重组抗体	190+嵌合抗体
包括1.6k+ 抗体对，便于试剂盒开发	用于灵活的试验设计	提供多克隆的广泛表位覆盖	提供灵活的宿主物种的选择

👉点击此处查找所有Abcam重组抗体

Abcam无载体重组抗体

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仅由抗体本身与PBS组成，不含BSA、叠氮化钠和甘油，专为抗体标记而设计，可随时偶联。可用于：

● 偶联反应

无需置换缓冲液或进行浓缩操作，方案简单，避免抗体损失，节省时间

● 多重检测平台

适合利用自有偶联抗体套装构建多重检测平台，包括CyTOF^®，mIHC应用 (InSituPlex^®， CODEX^®， GeoMx^® DSP，IMC™，循环免疫荧光CycIF技术等)

InSituPlex^® is a trademark of Ultivue; CODEX^® is a trademark of Akoya Biosciences；GeoMx^® is trademark of NanoString Technologies, Inc.; IMC™ is a trademark of Standard BioTools Inc.

● 免疫检测方法开发

适合ELISA、ELISA HTS、FRET/TR-FRET/HTRF、MESO Scale Discovery^® MSD^®、Luminex^® 及基于珠子检测方法、AlphaLISA^® / AlphaScreen^®、DELFIA^®、Simoa^® and Single Molecule Counting^®

MESO Scale Discovery^® and MSD^® are registered trademarks of Meso Scale Diagnostics, LLC. Luminex^® is a trademark of Luminex Corporation, registered in the US and other countries. AlphaLISA^®, AlphaScreen^®, and DELFIA^® are registered trademarks of PerkinElmer, Inc. Simoa^® is a registered trademark of Quanterix, Inc. SMCTM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany.

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Abcam重组直标抗体

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Abcam提供8,000+重组直标抗体，为细胞/组织免疫荧光、流式应用、新产品开发提供灵活的解决方案。Abcam重组直标抗体的主要优势：

• 高特异性、高灵敏度、批次间一致性好

• 偶联物多样，包含 Alexa Fluor^®、FITC、PE、APC、PerCP、HRP 和Biotin等。

• 严格的QC，确保抗体偶联后不丢失与抗原结合的能力

👉点击此处查看所有重组直标抗体

Abcam重组多克隆抗体

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重组多克隆抗体是多个精心挑选的、识别同一抗原上不同表位的重组单抗混合物。因此，其能实现与传统多抗类似的多表位覆盖效果，同时又保持重组抗体所具有的优势。Abcam因该项创新性的重组多克隆抗体系列荣膺CiteAb 2022年“年度创新奖”。

重组多克隆抗体由识别不同抗原表位的重组单抗构成

Abcam提供420+重组多克隆抗体，在实现同一抗原多表位覆盖的同时，确保批间一致性、高特异性和高灵敏度。特别适合：

1. 检测靶标多位点的翻译后修饰

2. 检测低丰度蛋白

3. 检测泛靶蛋白 (Pan-targets)

4. 关注跨物种靶标

5. 需要广泛表位覆盖的、采用重组抗体替代的应用，如ChIP

👉点击此处查看所有重组多克隆抗体

Abcam重组嵌合抗体

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Abcam重组嵌合抗体是将RabMAb^®兔单抗的可变区（含抗原结合位点）与不同种属（小鼠、大鼠、山羊、人等）的抗体恒定区进行基因层面的重组拼接后形成的嵌合抗体分子，见下图。

Abcam提供190+重组嵌合抗体，在保留RabMAb^®兔单抗高特异性、灵敏度的同时，更换抗体可变区种属，为low-plex多重标记提供灵活的解决方案。

👉点击此处查看所有重组嵌合抗体

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热门常见靶标的Abcam重组抗体

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靶点	货号	应用	说明
Ki67	👉ab16667	Flow Cyt (Intra), IHC-P, WB, mIHC, ICC/IF	细胞增殖
GFP	👉ab183734	Flow Cyt (Intra), WB, IHC-P, ICC/IF	报告基因蛋白
αSMA	👉ab124964	WB, IHC-P, ICC/IF, Flow Cyt (Intra)	Myofibroblast标记物
Vimentin	👉ab92547	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, WB, IHC-P, mIHC	间质标记物
PanCK	👉ab7753	IHC-P, mIHC, ICC/IF, IHC-Fr	上皮标记物
LC3B	👉ab192890	IHC-P, WB, ICC/IF	自噬
GSDMD	👉ab219800	Flow Cyt (Intra), IHC-P, IP, WB	细胞焦亡
Histone H3	👉ab176842	IHC-P, ICC/IF, PepArr, WB, ChIP, Flow Cyt (Intra)	ChIP实验常用，细胞核内参
Cleaved Caspase-3	👉ab32042	ICC/IF, WB	细胞凋亡
HIF-1 alpha	👉ab51608	ChIC/CUT&RUN-seq, Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-P, IP, WB	氧化应激
Collagen I	👉ab138492	WB, IHC-P, ICC/IF, IHC-F	胶原标记物之一

肿瘤研究热门靶标Abcam重组抗体

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靶点	货号	应用	说明
PD-L1	👉ab205921	Flow Cyt, ICC/IF, IHC-Fr, IHC-P, WB	肿瘤免疫检查点
p53	👉ab32049	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, WB, IHC-P, IP	经典抑癌基因
p21	👉ab109520	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-P, IP, WB	DNA损伤相关
β-Catenin	👉ab32572	IHC-P, WB, ICC/IF, IP, ChIP	Wnt经典信号关键介导蛋白
EGFR	👉ab52894	WB, IP, IHC-P, ICC/IF, Indirect ELISA, Flow Cyt (Intra)	酪氨酸激酶受体
RAS	👉ab275875	WB, IHC-P, IP, Flow Cyt (Intra)	经典癌基因
ERK1 + ERK2	👉ab184699	Flow Cyt (Intra), IP, ICC/IF, WB	MAPK/ERK信号关键蛋白
Bcl-2	👉ab182858	Flow Cyt (Intra), IHC-P, WB	凋亡相关
c-Kit	👉ab32363	IHC-P, WB	酪氨酸激酶
HER2	👉ab134182	WB, IP, ICC/IF, IHC-P	经典的治疗性靶点
VEGFA	👉ab52917	IHC-P, ICC/IF, Flow Cyt (Intra)	VEGF信号配体
c-Met	👉ab51067	I-ELISA, IHC-P, WB	经典的治疗性靶点

免疫研究热门靶标及Abcam重组抗体

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靶点	货号	应用	说明
CD3	👉ab21703	Flow Cyt (Intra), IHC-P, mIHC, WB	T细胞标记物
CD4	👉ab133616	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-P, mIHC, WB	Th细胞标记物
CD8	👉ab217344	Flow Cyt, IHC-Fr, IHC-P, IP, WB	Tc细胞标记物
CD56	👉ab75813	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-P, IP, WB	NK细胞标记物
CD68	👉ab955	ICC/IF, WB, IHC-P	巨噬细胞标记物
CD19	👉ab134114	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-Fr, IHC-P, WB	B细胞标记物
CD20	👉ab78237	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-P, IP, WB	B细胞标记物
CD45	👉ab40763	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-P, WB	白细胞标记物
FoxP3	👉ab215206	Flow Cyt (Intra), IHC-P, IP, mIHC, WB	Treg细胞标记物
IL-6	👉ab233706	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IP, WB	炎症因子
IL-8	👉ab289967	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IP, WB	炎症因子
IL-17A	👉ab302922	Flow Cyt (Intra), ICC/IF	炎症因子
NLRP3	👉ab263899	Flow Cyt (Intra), I-ELISA, IP, WB	炎症小体传感器蛋白
STAT3 (phospho Y705)	👉ab76315	Flow Cyt (Intra), WB, IP, IHC-P, Dot blot, ICC/IF, ELISA	转录因子，介导多个信号通路

神经研究热门靶标及Abcam重组抗体

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靶点	货号	应用	说明
NeuN	👉ab177487	Flow Cyt (Intra), IHC (PFA fixed), mIHC, IHC-P, WB, ICC/IF, IHC-Fr	成熟神经元标记物
GFAP	👉ab68428	WB, IP, IHC-P, ICC/IF, mIHC, Flow Cyt (Intra), IHC-Fr	星形胶质细胞标记物
Olig2	👉ab109186	ICC/IF, WB, IHC-P	少突胶质细胞标记物
Nestin	👉ab105389	ICC/IF, IHC-Fr, WB, IHC-P, Flow Cyt (Intra)	神经干细胞标记物
Alpha-synuclein	👉ab138501	Flow Cyt (Intra), WB, IHC-P, IP, ICC/IF	神经退行性疾病相关标记物
alpha Synuclein (phospho S129)	👉ab51253	IHC-FrFl, WB, Dot blot, ELISA, IHC-P	帕金森相关标记物
PGP9.5	👉ab108986	ICC/IF, Flow Cyt (Intra), IHC-Fr, WB, IP, IHC-P	帕金森相关
TMEM119	👉ab209064	IHC-Fr, IHC-P, IHC-FoFr	小胶质细胞标记物
Iba1	👉ab178846	Flow Cyt (Intra), IHC-P, WB, ICC/IF	小胶质细胞标记物
Synaptophysin	👉ab32127	WB, IHC-P, ICC/IF	神经内分泌相关标记物
beta Amyloid 1-42	👉ab201060	IHC-FrFl, Dot blot, IHC-P	AD标记物
Tau	👉ab80579	ICC/IF, WB	微管相关蛋白
Tau (phospho S396)	👉ab109390	Dot blot, IHC-Fr, IHC-P, WB, IP	AD相关标记物

表观研究热门靶标及Abcam重组抗体

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靶点	货号	应用
Histone H3 (di methyl K4)	👉ab32356	ChIC/CUT&RUN-seq, ChIP, ChIP-seq, Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-P, IP, WB
Histone H3 (acetyl K14)	👉ab52946	ChIP, ICC/IF, IHC-P, WB
Histone H3	👉ab176842	IHC-P, ICC/IF, PepArr, WB, ChIP, Flow Cyt (Intra)
Histone H3 (acetyl K27)	👉ab177178	ChIP, ChIP-seq, Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-P, PepArr, WB
Histone H3 (phospho S10 + T11)	👉ab32107	Dot, ELISA, ICC/IF, IHC-P, IP, WB
Histone H3 (tri methyl K27)	👉ab192985	ChIP, ChIP-seq, ELISA, ICC/IF, IHC-P, PepArr, WB
Histone H3 (acetyl K9)	👉ab32129	ChIP, ChIP-seq, Flow Cyt (Intra), ICC/IF, IHC-P, IP, WB
Histone H3 (tri methyl K9)	👉ab176916	ChIC/CUT&RUN-seq, ChIP, ChIP-seq, Dot, ICC/IF, IHC-P, PepArr, WB
Histone H3.3	👉ab176840	ChIP, ChIP-seq, Dot, ICC/IF, IHC-P, WB
Nrf2	👉ab62352	Flow Cyt (Intra), ChIP, ICC/IF, WB, IP, IHC-P
Rad51	👉ab133534	WB, IHC-P, ICC/IF, IP, Flow Cyt (Intra)
METTL3	👉ab195352	WB, IHC-P, ICC/IF, IP, Flow Cyt (Intra)
Brd4	👉ab128874	Flow Cyt (Intra), WB, IHC-P, ICC/IF
HMGB1	👉ab79823	Flow Cyt (Intra), ICC/IF, WB, IHC-P

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# 参考文献

Freedman, L., Cockburn, I. & Simcoe, T. The Economics of Reproducibility in Preclinical Research. PLOS Biology 13, e1002165 (2015).
Baker, M. 1,500 scientists lift the lid on reproducibility. Nature 533, 452–454 (2016).
Zhong Z, Sassi M, Heaton S, Koch S, De Block G, Conlon D, Lochead J, Dreja H, Munro M, Solache A, Hamilton B. Large-scale use of knockout validation to confirm antibody specificity. J Immunol 200 (1 Supplement) 120.18 (2018).

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